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細(xì)菌新型生化鑒定管使用說明
―― 070200 豬鏈球菌生化鑒定盒(15種×5次)
一)生化管的使用方法
開啟西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在無菌條件下,按鋁蓋上的箭頭方向打開鋁蓋,撕開鋁蓋,打開西林瓶膠塞(如圖1)。
所有的西林瓶在使用后均高壓滅菌后方可棄去。
二)豬鏈球菌生化鑒定盒的詳細(xì)使用方法
豬鏈球菌為革蘭氏陽性成對球菌、短鏈球菌。挑取羊血瓊脂平板上可疑的β溶血和γ溶血菌落進(jìn)行生化鑒定。
將疑是豬鏈球菌的新鮮菌苔置于已配備的無菌生理鹽水中,與0.5 McFarland的濁度管比濁,將菌懸液制備成0.5McFarland ( 約108cfu/mL ),用吸管吸取2滴(約0.06mL)菌懸液加入每種微量生化管內(nèi)。將已接種的西林瓶再套上膠塞,一般采用全加塞(如圖2左兩瓶所示),特殊情況在下表注明采用半加塞(如圖2右兩瓶所示),直立于內(nèi)托的凹槽內(nèi)(如圖2),或放置于合適的瓶架中,于35-37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),結(jié)果觀察見表1。
注意:如有特殊的接種方式、培養(yǎng)時間或培養(yǎng)方式,請詳見每種生化鑒定管附帶的使用說明。
表1 | ||||
產(chǎn)品名稱 | 結(jié)果判定 | 培養(yǎng)時間 (小時) | 備注說明 | |
陽性 | 陰性 | |||
葡糖糖磷酸鹽胨水(VP) | 紅色 | 不變色 | 48 | 培養(yǎng)后依次加入8滴VP試劑甲液及4滴乙液,混勻,再培養(yǎng)10-20分鐘觀察結(jié)果。 |
七葉苷 | 棕黑色 | 不變色 | 18-24 | |
6.5%高鹽肉湯 | 生長 | 不生長 | 24-48 | |
pH9.6肉湯 | 生長 | 不生長 | 24-48 | |
棉子糖、乳糖、甘露糖、山梨醇、阿拉伯糖、甘露醇、松三糖、D-核糖、菊糖 | 黃色 | 紫色 | 18-24 | |
甘油 | 黃色或黃綠色 | 不變色 | 18-24 | |
馬尿酸鹽 | 紫色 | 黃色或灰色 | 36℃±1℃培養(yǎng)4h或者36℃±1℃水浴2h | 刮取半環(huán)菌苔接種于反應(yīng)管中并用接種環(huán)攪拌成均一乳濁液,蓋緊膠塞。36℃±1℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4h或者36℃±1℃水浴2h,加茚三酮試劑5滴并再次蓋緊膠塞,在36℃±1℃水浴鍋或培養(yǎng)箱放置10min再觀察結(jié)果。 |
三)豬鏈球菌生化鑒定特征 (見表2)