產(chǎn)品名稱：sgRNA Screening and Genotype Confirmation Kit
中文名稱：sgRNA 篩選及基因型確認試劑盒
產(chǎn)品編號與包裝規(guī)格：
| 編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 產(chǎn)品介紹 | 價格 |
| HKE370 | sgRNA Screening and Genotype Confirmation Kit | 30次 | crispr基因編輯（篩選及基因型確認試劑盒） | 2492 |
產(chǎn)品描述：CRISPR/Cas9 是細菌和古細菌在長期演化過程中形成的一種適應(yīng)性免 疫防御系統(tǒng)。CRISPR/Cas9 系統(tǒng)通過將入侵噬菌體和質(zhì)粒 DNA 的片段整 合到 CRISPR 序列中，并利用相應(yīng)的 CRISPR RNAs（crRNAs）來指導(dǎo) Cas9 蛋 白 對 同 源 序 列 的 降 解 ， 從 而 提 供 免 疫 性 。 人 工 改 造 過 的 Cas9/sgRNA 系統(tǒng) 通過 sgRNA（short guide RNA）引導(dǎo) Cas9 蛋白識別并 剪切帶有 sgRNA 靶點 的雙鏈 DNA，可用于基因敲除和精確編輯 DNA 等 操作。
產(chǎn)品用途：
1)基于蛋白與 sgRNA 轉(zhuǎn)染的非病毒載體 CRISPR 基因敲除；
2)基于蛋白與 sgRNA 轉(zhuǎn)染的非病毒載體 CRISPR 基因敲入；
3)sgRNA 剪切靶點 DNA 的效率檢測，降低體內(nèi)篩選成本；
4)體外剪切靶 DNA 的特異位點；
5)DNA 編輯后基因型鑒定。
應(yīng)用實例：
圖例一：Cas9 Nuclease DNA 片段切割活 性檢測。
帶有靶位點的 DNA 片段：6100bp；
酶切后 的片段：3900bp 和 2200bp。
保存條件：-20℃保存，或-80℃長期保存。
sgRNA Screening and Genotype Confirmation Kit 產(chǎn)品包裝（A 包裝）：
| 組分 | 體積 |
| Cas9 Nuclease(1ug/μl) | 60μl |
| 10×Reaction Buffer | 60μl |
| 2×Amplification Mix | 1 mL |
| 1.5Kb Target DNA Control(50ng/μl) | 20μl |
| Control sgRNA(1μg/μl) | 20μl |
| RNase Free Water | 1 mL |
操作步驟：提取基因組 DNA，設(shè)計引物使用 2×Amplification Mix PCR 擴增得到含有編輯位點的目的片段后進行體外 切割。
體外切割體系（20μl）：
| 組分 | 體系 |
| 1.5Kb Target DNA Control | 200ng |
| Control sgRNA | 200ng |
| Cas9 Nuclease | 0.5-1μl |
| 10×Reaction Buffer | 2μl |
| RNase Free Water | To 20μl |
37℃ 反應(yīng) 1h，70℃加熱 10min 終止反應(yīng)。瓊脂糖凝 膠電泳檢測。
相關(guān)產(chǎn)品：
| 產(chǎn)品 | 目錄號 |
| Cas9(D10A) Nickase | HKE366 |
| Cas9(H840A) Nickase | HKE367 |
| Cas9(D10A,H840A) Nuclease | HKE368 |
| sgRNA In Vitro one-step Transcription Kit | HKE369 |
