細(xì)菌新型生化鑒定管使用說明
―― 071830 霍亂弧菌生化鑒定盒(23種×5次)
(SN/T 1022-2010)
一)整套試劑及用品
鑒定生化反應(yīng)的23種試劑(表1)、配套試劑各1瓶(靛基質(zhì)試劑、無菌液體石蠟)、5瓶0.85%無菌生理鹽水、1瓶0.5 McFarland的濁度管、5支一次性無菌吸管。
二)西林瓶的使用方法
開啟西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在無菌條件下,按鋁蓋上的箭頭方向打開鋁蓋,撕開鋁蓋,打開西林瓶膠塞(如圖1)。所有的西林瓶在使用后均高壓滅菌后方可棄去。
三)弧菌科生化鑒定盒的詳細(xì)使用方法
霍亂弧菌為革蘭氏陰性短小稍彎曲的桿菌,0.5-0.8×1.4-2.6μm,菌體一端有一條鞭毛,運動活潑。生長最適宜溫度為35℃~38℃最適pH7.2~7.4,在pH6.0~9.2內(nèi)可以生長,具有耐堿性。
挑取TCBS平板分離的可疑菌落進行革蘭氏染色鏡檢,將疑是霍亂弧菌的菌落接種于T1N1瓊脂上, 37±1℃培養(yǎng)18-24h,置于已配備的無菌生理鹽水中,與0.5 McFarland的濁度管比濁,將菌懸液制備成0.5McFarland ( 約1×108cfu/mL ),用吸管吸取2滴(約0.06mL)菌懸液加入每種微量生化管內(nèi)。將已接種的西林瓶再套上膠塞,一般采用全加塞(如圖2左兩瓶所示),特殊情況在下表注明采用半加塞(如圖2右兩瓶所示),直立于內(nèi)托的凹槽內(nèi)(如圖2),或放置于合適的瓶架中,于35-37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),結(jié)果觀察見表1。
注意:如有特殊的接種方式、培養(yǎng)溫度、時間或培養(yǎng)方式,請詳見每種生化鑒定管附帶的使用說明。
四)SN/T1022-2010霍亂弧菌生化鑒定特征見表2